Méthodes d'étude des médicaments

METHODES

D'ETUDE

Méthodes d'étude

Plusieurs méthodes d'étude ont été développées soit in vitro (sur les cellules tumorales) soit in vivo (sur les modèles animaux). Les résultats expérimentaux sont plus ou moins exploitables chez l'homme.

Méthodes non-clonogéniques

Les études clonogéniques sont longues à mettre en route. Toutes les tumeurs humaines ne poussent pas en culture clonogénique. La connaissance du mode d’action des drogues nouvelles permet une approche moléculaire précise pour une première sélection. Ont été utilisées les méthodes suivantes :

étude microscopique des lésions cellulaires,

atteinte de la membrane cellulaire (non exclusion du bleu trypan, perte du chrome radioactif),

diminution ou perte de la synthèse de macromolécules organiques : incorporation de thymidine tritiée dans le DNA, d’uridine tritiée dans le RNA, ou d’acides aminés des protéines,

diminution de la croissance cellulaire (mesurée par exemple par le dosage du DNA),

modification des paramètres de prolifération,

formation de micro noyaux,

lésions chromatiniennes détectées lors des mitoses.

Méthodes clonogéniques

Ce sont les seules qui permettent de juger de l’efficacité d’un médicament sur les cellules souches. Plusieurs techniques sont utilisées :

formation de colonies dans l’agar semi - solide ou la méthylcellulose,

utilisation de xénogreffes dans les souris nudes,

injection à des animaux syngéniques irradiés,

formation de colonies dans la rate d’animaux syngéniques,

formation de colonies dans les poumons d’animaux syngéniques.

Explication de l’intérêt de l’étude des cellules clonales en chimiothérapie.

Seules les cellules souches en cycle peuvent être atteintes par la chimiothérapie, encore que quelques cellules souches quiescentes puissent être atteintes.

Les autres cellules cancéreuses font du volume : leur diminution (notamment sous forme de réponse clinique) n’a aucune signification pronostique. Seules les réponses complètes prolongées apportent une véritable chance thérapeutique au malade.